細(xì)胞培養(yǎng)到底選用培養(yǎng)瓶?培養(yǎng)皿?還是培養(yǎng)板?這個(gè)問題的答案是:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮托枰獊磉M(jìn)行選擇!來讓我們一起看看培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板的選擇吧!
一、培養(yǎng)瓶
如果實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖桥囵B(yǎng)原代細(xì)胞和常規(guī)的傳代細(xì)胞,一般選擇用培養(yǎng)瓶,可獲得大量實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞。培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數(shù)字就是表面積,T25就是25cm2,T75就是75cm2,T1755就是175cm2。
常見的細(xì)胞培養(yǎng)瓶分為一次性的塑料瓶和玻璃瓶,他們各有特色。玻璃瓶的優(yōu)點(diǎn)是:成本低、透光性強(qiáng)、可重復(fù)使用,缺點(diǎn)是:難于清洗,不易保存。塑料瓶的優(yōu)點(diǎn)是:質(zhì)地均勻、產(chǎn)量大、成本低、便捷性強(qiáng),缺點(diǎn)是:其表面具有疏水性,不利于細(xì)胞貼壁生長,需要通過特殊的工藝處理,例如射線照射、電離輻射,這樣處理過的表面細(xì)胞才能更好的貼在上面生長。
如果選擇培養(yǎng)瓶培養(yǎng),還應(yīng)該盡量選擇有斜肩設(shè)計(jì)、帶透氣孔瓶蓋的型號。
斜肩設(shè)計(jì)可以避免培養(yǎng)瓶平放后,過多的培養(yǎng)基接觸瓶蓋造成污染,帶透氣孔瓶蓋可以保持內(nèi)外的二氧化碳濃度一致。如果瓶蓋不透氣,那在放進(jìn)培養(yǎng)箱時(shí),應(yīng)擰松一圈,以便內(nèi)外氣體能順利交換。
二、培養(yǎng)皿
培養(yǎng)皿的操作比較方便,不管是換液、傳代、還是收獲細(xì)胞,但因?yàn)槠溟_口很大,所以容易污染,如果你是新手,不建議直接用培養(yǎng)皿養(yǎng)細(xì)胞。
三、培養(yǎng)板
以細(xì)胞為載體或?qū)ο蟮膶?shí)驗(yàn)使用培養(yǎng)板較好,如藥敏試驗(yàn)、MTT(96孔培養(yǎng)板)、免疫組化(6孔培養(yǎng)板)等。
選擇好合適的孔板后,在培養(yǎng)階段,有2點(diǎn)注意事項(xiàng):
(1)多孔板會(huì)帶板蓋,但其密封性不好,在培養(yǎng)箱內(nèi)會(huì)造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高,進(jìn)而影響細(xì)胞生長速率。有條件的同學(xué),可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜。或者舍棄邊緣孔位,并采用添加培養(yǎng)基來代替。
(2)當(dāng)細(xì)胞種入孔內(nèi)以后,不應(yīng)該再進(jìn)行過多的震動(dòng),例如晃動(dòng)、抖動(dòng)培養(yǎng)板,而應(yīng)該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。如果培養(yǎng)箱由多人共用,還應(yīng)該考慮大家頻繁開關(guān)箱門、拿放孔板造成的震動(dòng),這些不利因素都應(yīng)該盡量減少。
需要注意的是,培養(yǎng)板相對更容易受到污染,所以操作時(shí)要格外小心。
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